水樣中六價鉻離子（Cr⁶⁺）濃度檢測試劑盒說明書

                                                     微量法100T/96S

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

Cr⁶⁺主要來自電鍍、冶煉、表面處理工業(yè)等排放的污水和廢氣。通過消化道、呼吸道、皮膚及粘膜Cr⁶⁺進入人體，造成傷害，甚至引起遺傳變異而致癌。

測定原理：

在酸性環(huán)境中，Cr⁶⁺與二苯碳酰二肼作用生成紫紅色絡合物，在540nm有特征光吸收。

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍、丙酮和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體1.1mL×1管，室溫保存。

試劑二：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1.4 mL丙酮充分溶解，顏色變深后不能再用。

標準品：液體1mL×1管，60 nmol/mL Cr⁶⁺，室溫保存。

水樣中六價鉻離子檢測：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節(jié)波長到540nm，蒸餾水調零。

2. 標準管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL標準液，180μL蒸餾水，混勻；加10μL試劑一，10μL試劑二，充分混勻；室溫下靜置10min，于540nm測定吸光度，記為A標準管。

3. 水樣測定：

（1）無色水樣直接測定：取微量石英比色皿/96孔板，加入200μL無色水樣，10μL試劑一，充分混勻；再加入10μL試劑二，充分混勻；室溫下放置10min。于540nm測定吸光度，記為A測定管。

（2）有色水樣：取微量石英比色皿/96孔板，加入200μL水樣，10μL試劑一，蓋緊混勻后置于沸水浴中2min，退色；冷卻后加10μL試劑二，充分混勻；室溫下放置10min。于540 nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：標準管只需測定一次。

六價鉻離子濃度計算：

C_Cr⁶⁺(μmol/L)= C標準管÷標準品稀釋倍數(shù)×(A測定管÷A標準管) ×V總

=6000×(A測定管÷A標準管)

C標準：60nmol/mL=60 μmol/L；標準液稀釋倍數(shù)：（20 μL標準液+180μL蒸餾水）÷20 μL標準液=10； V總：1L=1000 mL

注意事項：

1. 水樣中鐵約50倍于六價鉻時，產生黃色，干擾測定，不宜用本試劑盒進行測定；10倍于鉻的釩可產生干擾，但顯色20min后釩與試劑所顯色全部消失；200mg/L以上的鉬與汞有干擾；

2. 六價鉻離子為重金屬有毒離子，測定過程中應注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到。

3. Z低檢出限為1mmol/L。